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试管婴儿胚胎冷冻有什么方法?

文章导读:

人类第一例冻融胚胎“试管婴儿”诞生,此后大量试管婴儿剩余胚胎被冻存。目前在辅助生殖技术中不仅人植入前胚胎和精子的冻存技术(cryopresenration)得到广泛应用,而且冻存人卵母细胞和卵巢组织的研究及临床应用也取得了极大进展。

  自1948年利用甘油作为冷冻保护剂冻存牛精子获得成功后,1972年冻融小鼠胚胎成功 妊娠并获子代出生,引起了学术界的广泛关注,为冷冻人类胚胎奠定了基础。1983年,人类第一例冻融胚胎“试管婴儿”诞生,此后大量试管婴儿剩余胚胎被冻存。目前在辅助生殖技术中不仅人植入前胚胎和精子的冻存技术(cryopresenration)得到广泛应用,而且冻存人卵母细胞和卵巢组织的研究及临床应用也取得了极大进展。

  1.慢速冷冻

  慢速冷冻 或平衡冷冻又称程序化冷冻。慢速冷冻技术的原理是通过逐步降温来实现细胞的逐步脱水,以达到避免或降低细胞内冰晶形成的目的。目前国内外大多数中心采用 的都是这种方法。为了减少脱水的损伤,细胞需要在脱水开始前与冷冻保护剂平衡,因此又 称平衡冷冻。

  慢速冷冻的效果还是比较理想的,尤其广泛应用于人卵裂期胚胎,通常能达到70%以上的胚胎存活率,移植后的妊娠率和足月产率也与新鲜周期相当。但慢速冷冻也存在着不足如费时,一般需要2~3小时;程序降温仪费用昂贵;同时需要消耗大量的液氮。

  2.玻璃化冷冻

  玻璃化冷冻 又称非平衡冷冻,是使用高浓度的渗透性和非渗透性冷冻保护剂使细胞内外液的同源晶核形成温度与玻璃态转化温度接近,以约每分钟下降2500~C以上的速度迅速降温,使细胞内液体转化为类似玻璃样的非晶体化状态,细胞内分子、离子仍处于正常分布而免受损伤。

  与慢速冷冻相比,玻璃化冷冻具有以下优点:

  ①玻璃化技术本身可以有效地防止细胞内外冰晶的形成,跨膜物质浓度与渗透压差不大,不易产生不可逆的细胞膜损伤;

  ②不需要充分脱水,大大简化冷冻过程;

  ③不需要昂贵的仪器,不消耗液氮;

  ④在动物试验中比常规慢速冷冻的复苏后存活率高。

  近几年来,玻璃化冷冻不仅成功应用于人卵裂期胚胎的冻存,而且在囊胚和卵母细胞的冷冻保存方面显示出其优越性,获得较高的复苏后存活率和妊娠率。

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